人源病龄基底胆碱能神经元ECT-BFCN

        采用 ECT 技术从人皮肤成纤维细胞直接诱导转化制备的正常人或患者病龄基底胆碱能神经元 (ECT-BFCN），保留了源细胞的年龄属性，并具有正常人或患者基底胆碱能神经元的生理功能或病理特征。ECT-BFCN 系列产品可作为疾病研究与药物研发的一种可靠的细胞模型工具，适用于老年性痴呆症的病理机制研究、药物筛选、药理药效学分析、毒理学测试、靶点发现及基因疗法研发。在年龄密切关联的疾病机理研究及药物研发中，病龄 ECT-BFCN 是现有胚龄神经元（如 iPSC 分化产品）的一种理想的替代产品，更利于揭示随年龄增长出现的致病基因表达变化相关联的病理机制，发现诊断指标，或筛选研发作用于年龄相关靶点的有效化合物。

基底胆碱能神经元产品纯化、冻存复苏及长期培养示意图

A. 成年人 ECT-BFCN201 经纯化后在 ECT-CR 包被的盖玻片上于 ECT-NM 中过夜培养，标尺=100µm。

B. ECTBFCN201 冻存复苏后在 ECT-CR 包被的培养孔板上可以长期培养，

形成致密神经网络，标尺=50µm。

基底胆碱能神经元表达一般神经元特征蛋白质示意图：Tuj1, 99%；MAP2, 99%

A. GFP 阳性 ECT-BFCN 表达一般神经元特征蛋白质 Tuj1；

B. GFP 阳性 ECT-BFCN 表达一般神经元特征蛋白质MAP2，标尺=50µm。

基底胆碱能神经元表达胆碱能神经元特征标志蛋白质示意图：ISL1, 99%; ChAT, 99%

A. GFP 阳性 ECT-BFCN表达胆碱能神经元特征标志蛋白质 ISL1；

B. GFP 阳性 ECT-BFCN 表达胆碱能神经元特征标志蛋白质ChAT，标尺=50µm。

培养时间与形态特征：接种后快速贴壁并长出神经突起，可长期培养至三个月以上，其胞体隆起饱满，神经突起持续生长、分叉延伸并形成神经网络。

年龄特征：与新生儿皮肤细胞转化的 ECT-BFCN102 比较，成年人皮肤细胞转化的ECT-BFCN201 显示了老化相关的显著特征。

基底胆碱能神经元年龄相关特征示意图

A. 衰老标记物 β-Gal 染色在成年人 ECT-BFCN201 中显著增强，标尺=20µm；

B.端粒保护性抗氧化酶（PRDX1）表达水平在成年人 ECT-BFCN201 中显著降低，标尺=50µm；

C.长寿相关异染色质蛋白（HP1γ）表达水平在成年人 ECT-BFCN201 中显著降低，标尺=50µm。